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猪伪狂犬病毒gE抗体检测试剂盒 使用说明书
猪伪狂犬病毒gE抗体检测试剂盒
使用说明书2.0
版号：PRV-gE 181118
介绍
猪伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）抗体检测试剂盒用于检测猪血清中的抗PRV-gE抗体，是区分gE基因缺失疫苗免疫与自然感染的有效工具。
本试剂盒采用阻断法ELISA，在酶标板条微孔上预包被PRV-gE抗原。在试验中，加入稀释后的待检血清，经过温育后，若样品中含有抗PRV-gE特异性抗体，则与包被板上的抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后，再加入酶标的抗PRV-gE抗体，样本中的抗体阻断了酶标抗体与包被板上抗原的结合，经洗涤除去未结合的酶结合物，在微孔中加入TMB显色液，经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗体含量成反比，加入终止液终止反应后，用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。
组份
1 | 抗原包被板 | 1/2块 | 7 | 阴性对照 | 1ml |
2 | 稀释板 | 1/2块 | 8 | 阳性对照 | 0.8ml |
3 | 酶结合物 | 11/22ml | 9 | 封板膜 | 2/4张 |
4 | 样本稀释液 | 100ml | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 10倍浓缩洗涤液 | 100ml | 11 | 终止液 | 15ml |
6 | 显色液 | 11/22ml |
需自备的设备及试剂
1. 微量移液器：10µl-100µl、100µl-1000µl。
2. 一次性移液器吸头。
3. 量筒：500ml。
4. 96孔板酶标仪。
5. 蒸馏水或去离子水。
6. 洗瓶或洗板机。
样品制备
取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。
样品的稀释
在血清稀释板中按1:1的体积比稀释待检血清以及阴、阳性对照品（例如：60ul的血清加入60ul的样本稀释液）。阴性对照稀释2孔，阳性对照稀释1孔。
注意：取每个样品后都要更换吸头，并准确记录每个样品在板上的位置。每个样品在加入到包被板微孔前应充分混匀。
洗涤液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温，如有盐结晶，摇动使结晶的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
注意事项
1. 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，应将试剂盒各组份放置室温至少1小时以上。使用前应摇匀，使用后放回2-8℃。
2. 不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。
3. 终止液对皮肤和眼可能有刺激性，使用时应该注意防护。
4. TMB（显色液）不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
5. 检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中，并尽快置于2-8℃)。
6. 所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
7. 严格遵守操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
8. 抗原包被板为一次性用品，不得重复使用。
操作步骤
1. 取出所需抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），将稀释好的待检血清以及阴阳性对照品取100μl加入到板孔中。
2. 盖上封板膜（可按实际需要自行裁剪），置37℃温育60分钟。
3. 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，使用工作浓度洗涤液每孔加250ul，后甩去孔内液体，以上步骤重复6次，最后在干净吸水纸上拍干。
4. 每孔加酶结合物100μl，盖上封板膜，置37℃温育30分钟。
5. 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗涤6次, 方法同3。切记最后在干净吸水纸上拍干。
6. 每孔加显色液100µl，轻微震荡混匀，盖上封板膜37℃闭光显色15分钟。每孔加终止液50μl，使反应终止，10分钟内测定结果。
结果判定
用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度OD值。
试验成立的条件是：
阴性对照均值 - 阳性对照值 ≥0.300
计算方法：
S/N= 样品OD值 ÷ 阴性对照OD均值
阴阳性判断：
阴性：S/N ＞ 0.70
可疑：0.60 < S/N ≤ 0.70
阳性：S/N ≤ 0.60
有效期
贮存方法： 2 - 8ºC下贮存。
有效期： 12个月。
南京杜佰生物科技有限公司 出品
电话: 025-6611 8188/6601 8988
手机：178 9500 6881
网址: www.bioduby.com
邮箱: bioduby@163.com
猪伪狂犬病毒gE抗体检测试剂盒 使用说明书
猪伪狂犬病毒gE抗体检测试剂盒
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版号：PRV-gE 181118
介绍
猪伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）抗体检测试剂盒用于检测猪血清中的抗PRV-gE抗体，是区分gE基因缺失疫苗免疫与自然感染的有效工具。
本试剂盒采用阻断法ELISA，在酶标板条微孔上预包被PRV-gE抗原。在试验中，加入稀释后的待检血清，经过温育后，若样品中含有抗PRV-gE特异性抗体，则与包被板上的抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后，再加入酶标的抗PRV-gE抗体，样本中的抗体阻断了酶标抗体与包被板上抗原的结合，经洗涤除去未结合的酶结合物，在微孔中加入TMB显色液，经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗体含量成反比，加入终止液终止反应后，用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。
组份
1 | 抗原包被板 | 1/2块 | 7 | 阴性对照 | 1ml |
2 | 稀释板 | 1/2块 | 8 | 阳性对照 | 0.8ml |
3 | 酶结合物 | 11/22ml | 9 | 封板膜 | 2/4张 |
4 | 样本稀释液 | 100ml | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 10倍浓缩洗涤液 | 100ml | 11 | 终止液 | 15ml |
6 | 显色液 | 11/22ml |
需自备的设备及试剂
1. 微量移液器：10µl-100µl、100µl-1000µl。
2. 一次性移液器吸头。
3. 量筒：500ml。
4. 96孔板酶标仪。
5. 蒸馏水或去离子水。
6. 洗瓶或洗板机。
样品制备
取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。
样品的稀释
在血清稀释板中按1:1的体积比稀释待检血清以及阴、阳性对照品（例如：60ul的血清加入60ul的样本稀释液）。阴性对照稀释2孔，阳性对照稀释1孔。
注意：取每个样品后都要更换吸头，并准确记录每个样品在板上的位置。每个样品在加入到包被板微孔前应充分混匀。
洗涤液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温，如有盐结晶，摇动使结晶的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
注意事项
1. 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，应将试剂盒各组份放置室温至少1小时以上。使用前应摇匀，使用后放回2-8℃。
2. 不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。
3. 终止液对皮肤和眼可能有刺激性，使用时应该注意防护。
4. TMB（显色液）不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
5. 检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中，并尽快置于2-8℃)。
6. 所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
7. 严格遵守操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
8. 抗原包被板为一次性用品，不得重复使用。
操作步骤
1. 取出所需抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），将稀释好的待检血清以及阴阳性对照品取100μl加入到板孔中。
2. 盖上封板膜（可按实际需要自行裁剪），置37℃温育60分钟。
3. 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，使用工作浓度洗涤液每孔加250ul，后甩去孔内液体，以上步骤重复6次，最后在干净吸水纸上拍干。
4. 每孔加酶结合物100μl，盖上封板膜，置37℃温育30分钟。
5. 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗涤6次, 方法同3。切记最后在干净吸水纸上拍干。
6. 每孔加显色液100µl，轻微震荡混匀，盖上封板膜37℃闭光显色15分钟。每孔加终止液50μl，使反应终止，10分钟内测定结果。
结果判定
用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度OD值。
试验成立的条件是：
阴性对照均值 - 阳性对照值 ≥0.300
计算方法：
S/N= 样品OD值 ÷ 阴性对照OD均值
阴阳性判断：
阴性：S/N ＞ 0.70
可疑：0.60 < S/N ≤ 0.70
阳性：S/N ≤ 0.60
有效期
贮存方法： 2 - 8ºC下贮存。
有效期： 12个月。
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