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一、介绍
鸡H9亚型禽流感抗体检测试剂盒检测鸡血清中的H9亚型禽流感抗体,用于评估养鸡场鸡禽流感疫苗免疫状况及感染鸡的血清学辅助诊断。
本试剂盒采用间接ELISA法,在酶标板微孔上预包被H9禽流感抗原。在试验中,加入稀释后的待检血清,经过温育后,若样品中含有H9禽流感特异性抗体,则与包被板上的抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后,加入酶标二抗,与检测板上的抗原抗体复合物发生特异性结合,再经洗涤除去未结合的酶结合物,在微孔中加入TMB底物液,经酶催化形成蓝色产物,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。
二、组份
1 | 抗原预包被板条 | 1/2块 | 7 | 阴性对照 | 0.8/1.6ml |
2 | 酶结合物 | 11/22ml | 8 | 阳性对照 | 0.8/1.6ml |
3 | 10倍浓缩洗涤液 | 100ml | 9 | 血清稀释 | 1/2块 |
4 | 显色液 | 11/22ml | 10 | 封板膜 | 2/4张 |
5 | 样本稀释液 | 50/100ml | 11 | 说明书 | 1份 |
6 | 终止液 | 11ml |
三、需自备的设备及试剂
微量移液器: 0.5µl-10µl、10µl-100µl、100µl-1000µl。
一次性移液器吸头。
酶标仪。
蒸馏水或去离子水。
洗瓶或洗板机。
样品制备
取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。
四、洗涤液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
五、样品的稀释
在血清稀释板中按1:100的体积比稀释待检血清(例如:495μl样品稀释液中加5μl待检血清)。
注意:阴性和阳性对照不用稀释。取每个样品后都要更换吸头,准确记录每个样品在板上的位置。每个样品在加入到包被板微孔前应充分混匀。
六、注意事项
试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,使用前应摇匀,使用后放回2-8℃。
不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。
显色液不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2-8℃)。
所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
严格遵守操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
血清稀释板为一次性用品,不得重复使用;血清稀释板的最大容量为300μl/孔。
七、操作步骤
取预包被的检测板(根据样品多少,可拆开分次使用),将稀释好的待检血清取100μl加入到检测板孔中。同时设同时设阴性对照1孔,阳性对照2孔,取阴性及阳性对照各100μl分别加入反应孔中。轻轻振匀孔中样品(勿溢出)。
盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作浓度洗涤液每孔加250ul,后甩去孔内液体,以上步骤重复5次,最后在干净吸水纸上拍干。
每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤5次, 方法同3。切记最后在干净吸水纸上拍干。
加显色液100µl,盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。
每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。
八、结果判定
用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度OD值。
试验成立的条件是:
阴性对照(N)OD值<0.15,同时阳性对照(P)OD值〉0.4。
计算方法:
样品OD值÷阳性对照OD均值=S/P值
阴阳性判断:
S/P值≥0.25判断为阳性;
S/P值<0.25判断为阴性。
九、贮存方法: 2 - 8ºC下贮存。
十、有效期: 12个月。
1 禽流感H9亚型抗体检测卡
2 禽流感H5亚型抗体检测卡
3 禽流感H7亚型抗体检测卡
4 禽流感抗原检测卡
4 禽流感抗原检测卡
5 H5亚型禽流感抗原检测卡
6 H7亚型禽流感抗原检测卡
7 H9亚型禽流感抗原检测卡
一、介绍
鸡H9亚型禽流感抗体检测试剂盒检测鸡血清中的H9亚型禽流感抗体,用于评估养鸡场鸡禽流感疫苗免疫状况及感染鸡的血清学辅助诊断。
本试剂盒采用间接ELISA法,在酶标板微孔上预包被H9禽流感抗原。在试验中,加入稀释后的待检血清,经过温育后,若样品中含有H9禽流感特异性抗体,则与包被板上的抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后,加入酶标二抗,与检测板上的抗原抗体复合物发生特异性结合,再经洗涤除去未结合的酶结合物,在微孔中加入TMB底物液,经酶催化形成蓝色产物,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。
二、组份
1 | 抗原预包被板条 | 1/2块 | 7 | 阴性对照 | 0.8/1.6ml |
2 | 酶结合物 | 11/22ml | 8 | 阳性对照 | 0.8/1.6ml |
3 | 10倍浓缩洗涤液 | 100ml | 9 | 血清稀释 | 1/2块 |
4 | 显色液 | 11/22ml | 10 | 封板膜 | 2/4张 |
5 | 样本稀释液 | 50/100ml | 11 | 说明书 | 1份 |
6 | 终止液 | 11ml |
三、需自备的设备及试剂
微量移液器: 0.5µl-10µl、10µl-100µl、100µl-1000µl。
一次性移液器吸头。
酶标仪。
蒸馏水或去离子水。
洗瓶或洗板机。
样品制备
取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。
四、洗涤液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
五、样品的稀释
在血清稀释板中按1:100的体积比稀释待检血清(例如:495μl样品稀释液中加5μl待检血清)。
注意:阴性和阳性对照不用稀释。取每个样品后都要更换吸头,准确记录每个样品在板上的位置。每个样品在加入到包被板微孔前应充分混匀。
六、注意事项
试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,使用前应摇匀,使用后放回2-8℃。
不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。
显色液不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2-8℃)。
所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
严格遵守操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
血清稀释板为一次性用品,不得重复使用;血清稀释板的最大容量为300μl/孔。
七、操作步骤
取预包被的检测板(根据样品多少,可拆开分次使用),将稀释好的待检血清取100μl加入到检测板孔中。同时设同时设阴性对照1孔,阳性对照2孔,取阴性及阳性对照各100μl分别加入反应孔中。轻轻振匀孔中样品(勿溢出)。
盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作浓度洗涤液每孔加250ul,后甩去孔内液体,以上步骤重复5次,最后在干净吸水纸上拍干。
每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤5次, 方法同3。切记最后在干净吸水纸上拍干。
加显色液100µl,盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。
每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。
八、结果判定
用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度OD值。
试验成立的条件是:
阴性对照(N)OD值<0.15,同时阳性对照(P)OD值〉0.4。
计算方法:
样品OD值÷阳性对照OD均值=S/P值
阴阳性判断:
S/P值≥0.25判断为阳性;
S/P值<0.25判断为阴性。
九、贮存方法: 2 - 8ºC下贮存。
十、有效期: 12个月。
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